他的研究方向从观察转向了干预。他开始尝试各种方法来影响端粒的长度,从化学物质到物理刺激,但他都没有找到有效的手段。经费越来越少,实验室的条件也越来越差,但他没有放弃。他翻阅了大量的生物化学和分子生物学文献,试图从已知的生物分子中寻找线索。
一个偶然的机会,他在一篇尘封已久的论文中,看到了一种酶的描述——端粒酶。这种酶存在于生殖细胞和癌细胞中,能够合成端粒。这篇论文发表于几十年前,并没有引起太多关注,因为当时的科学家认为这种酶只与生殖和癌症有关,与衰老无关。但林逸却像抓住了救命稻草。他意识到,这可能是开启生命时钟的钥匙。
他开始将所有的精力都投入到对端粒酶的研究中。他想方设法获取了端粒酶的基因序列,并在实验室里尝试表达这种酶。然而,表达端粒酶的难度超出了他的想象。这种酶的结构复杂且不稳定,很难在体外成功表达。他尝试了各种表达系统,细菌、酵母、昆虫细胞,但都以失败告终。
在最艰难的时候,他甚至考虑过放弃。但他一闭上眼,就看到了那些被疾病和衰老折磨的人们,看到了那些因年迈而失去尊严的生命。他告诉自己,不能放弃,无论如何都要坚持下去。
他开始将目光转向更基础的研究。他意识到,仅仅表达端粒酶是不够的,还需要找到调控端粒酶活性的开关。他开始研究与端粒酶相关的信号通路,研究细胞内环境对端粒酶的影响。这项工作更加困难,因为细胞内的信号通路错综复杂,相互交织,就像一张巨大的蜘蛛网。
他设计了一系列精巧的实验,利用基因编辑技术和荧光标记技术,追踪细胞内端粒酶的定位和活性变化。他发现,端粒酶的活性受到多种因素的调控,包括细胞周期、氧化应激、甚至营养状况。他逐渐描绘出了端粒酶调控网络的蓝图。
在这个过程中,他遇到了另一个重要的难题:如何将端粒酶有效地导入到体细胞中并使其稳定表达。病毒载体是一种常用的方法,但存在免疫原性和安全性问题。非病毒载体效率低下,难以实现长期稳定的表达。他尝试了各种新型载体,脂质体、纳米颗粒,但他都没有找到理想的解决方案。
他开始思考,有没有可能不直接导入端粒酶,而是通过调控细胞内的信号通路,激活细胞自身表达的端粒酶?他回到了最初的研究方向,那些与端粒酶相关的调控因子。他发现,某些特定的信号分子能够显著提高细胞内端粒酶的表达水平。
这个发现让他激动不已。这意味着,或许可以通过药物或其他手段,激活细胞自身的“生命时钟”。他开始筛选能够激活这些信号分子的化合物。这是一项巨大的工程,需要筛选数以万计的化合物。他没有足够的资源,也没有足够的人手。