吴世勋：手握重权，可自由出入皇宫，与谈訫儿是一同长大的青梅竹马。性格沉稳内敛，唯独对谈訫儿展现出极致温柔，将护她周全的心意藏在每一个细节里，是她最安心的依靠。
• 边伯贤：官职显赫，同样能随意进出宫内，与吴世勋、谈訫儿自幼相伴。性格风趣灵动，总能用俏皮话逗笑谈訫儿，看似玩世不恭，实则早已将她放在心尖，甘愿为她赴汤蹈火。
• 谈訫儿：出身金城顶级世家，家世显赫到无人敢轻易招惹。性格明媚聪慧，在吴世勋、边伯贤的宠爱中自在随心，却不娇纵，有着不逊色于两人的主见与胆识，与两人感情深厚，只差一纸婚约。
医馆核心
• 朱一品：天和医馆的大夫，拥有过目不忘的“神速记忆”。为人正直善良，略带憨厚，因师父陈幕蝉离奇失踪、意外卷入卷轴秘密，从此带领众人踏上探案之路，是团队中的“智慧担当”，平日称陈安安为“安安”。
• 陈安安：天和医馆掌柜的女儿，性格娇俏活泼，对朱一品心生爱慕，平日称朱一品为“朱哥哥”。父母出事前曾托付朱一品照顾她，是医馆里热闹的“小太阳”。
• 赵布助：天和医馆的杂役，老实本分，一心喜欢陈安安，即便屡屡被她忽视也不曾放弃。对医馆众人忠心耿耿，擅长打理杂务，是团队里不可或缺的“后勤能手”。
• 陈幕蝉：朱一品的师父，天和医馆前任馆主，医术高明。他的离奇失踪是故事的开端，其背后似乎藏着与卷轴、神秘势力相关的秘密。
厂卫与好友势力
• 杨宇轩：东厂高手，高大英俊，身手不凡。受东厂指派卧底医馆查探卷轴秘密，性格冷峻寡言，在与医馆众人相处中逐渐卸下防备，前女友聂紫衣的出现让他的心境变得复杂。
• 柳若馨：西厂高手，年轻貌美，武功高强，是谈訫儿的好闺蜜。奉西厂之命潜伏医馆，性格飒爽直率，起初为任务而来，后来与医馆众人结下深厚情谊。
• 聂紫衣：锦衣卫副千户，性格果决干练，是谈訫儿的好闺蜜（第7章登场）。作为杨宇轩的前女友，她的出现不仅搅乱了杨宇轩的生活，也为探案增添了更多变数。
• 汪公公：西厂负责人，柳若馨的义父。心思深沉，对西厂事务掌控欲极强，是柳若馨在官场中的“靠山”，行事背后藏着不为人知的算计。
• 曹公公：东厂管事，杨宇轩的上司。行事严谨，手段狠辣，对卷轴秘密极为看重，不断给杨宇轩的卧底任务施加压力。
其他配角
• 庄田田：天和医馆旁边豆腐摊的摊主，性格温柔善良，是陈安安的好朋友。经常给医馆众人送新鲜豆腐，见证了医馆的许多故事，偶尔能为探案提供意想不到的线索。
• 庄妈妈：庄田田的母亲，朴实热心，后续剧情中不慎被骗进传销，不仅损失大量钱财，还以儿子的名义贷款，让庄田田陷入困境。
• 苟尚仁：陈安安父亲早年的学徒，离开京城多年后重返，在天和医馆对面开了一家医馆，成为直接竞争对手。为人精明，手段颇多，处处针对天和医馆，试图抢夺生意。
• 杨老实：普通百姓，因老家出事，带着徒弟赶往京城投奔表弟赵布助（将在神算子案中登场），他的到来意外牵扯出与案件相关的关键线索。
• 皇上：明朝君主，威严庄重，对卷轴背后的秘密及一系列离奇案件极为关注，是影响剧情走向的关键人物。
• 万妃：皇上的妃子，外表温婉贤淑，在后期剧情中逐渐显露身影，其真实身份藏有重大悬念。
• 王公公：宫中太监，性格谨慎，在皇上、万妃登场后随之出现，负责传递宫中消息，偶尔成为连接医馆与皇宫的“桥梁”。
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